Procedimiento a llevar para un correcto corte en

microtomo de hierbabuena




1. FIJADOR: SOLUCION FAA alcochol etilico sl 70% 90 cm, acido acetico glacial 5cm y formol al 37% 37 cm. Tiempo de la fijacion 24 horas. se cortan las partes deseadas de la planta y se ponen en un envase que deja flotar las partes cortadas y deja reposar durante 24 horas .


2. se lava con alcohol al 50 % luego se pone en un casette de inclusion.

3. Proceso de desidratacion (alcoholes ascendentes).

Alcoholes

Al 50% x12 horas

Al70% x12 horas

Al 80% x12horas

Al95% x12horas

4. Proceso de aclaramiento: Se mete en una mezcla de alcochol etilico y ter butanol, una porcion por tres de alcohol etilico al 95% y se deja 12 horas.Se pone en alcochol etilico al 50% por 12 horas,Se pone en alcohol etilico y ter butanol por 12 horas,Ter butanol por 12 horas.


5.En parafina liquida al 50% y 50% de ter butanol por 6 horas,Se mete en parafina pura al 50% y terbutanol al 50% por 6 horas,despues se mete en parafina pura de nuevo al 56% por 6 horas.


6. se deja 12 horas en un horno para derretir la parafina ,con 30 ml de xilol se quita el exceso de parafina,despues con alcochol se quita el exceso de xilol,despues de vuelve a pasar por alcoholes 95%,80%,70%,50%.


7. se lava luego con H20 corriente y se pone un una solucion de safranina por 24 horas,Se lava con agua corriente y se quita el exceso de safranina,Se pasa por alcohol con gotas de acido clorhidrico que decolora la muestra


8. Luego en alcohol con gotas de amoniaco para neutralizar el decoloro,Se pasa en un alcochol al 95% y se contrasta con fast green por 20 segundos,Se pasa por escencia de clavo o aceite de clavo y xilol .


Escencia de clavo y en etil butanol.

Y por ultimo se lleva a cortar al microtomo para lograr un corte perfecto de la muestra tomada de la planta deseada.



TEJIDOS MERISTEMATICOS (EN RAIZ)











Imagen 1.puede observarse el cilindro vascular en el centro del corte con forma circular al igual que cada una de las celulas que lo componen (1), algunas de xilema otras de floema. podemos observar siguiendo hacia afuera el meristemo cortical que son polimorficos es decir no tienen una forma geometrica definida (2) seguida por una epidermis (3) de poca diferenciacion morfologica pero normalmente son de forma rectangular, ademas podemos observar un pelo radicular (4) y un conducto (5) que conecta al cilindro vascular con el pelo radicular que aunque no se ve definido con claridad si alcanzamos a ver una diferenciacion de color..





OBJETIVOS:





°Reconocer la estructura del tejido meristematico en diferentes cortes realizados.

°Realizar una correcta tincion en cada uno de los cortes, para conseguir montajes perfectos para la observacion de los tejidos.







Que es un tejido meristematico?







Tecnica de corte a mano alzada por Betzaida Rivera



Imagen 2. se pueden ver celular rectangulares bien definidas(1), con paredes primarias delgadas y de coloracion mas oscura que el interior de la celula(2), al interior de este se encuentra el nucleo (3) ligeramente teñido de un rojo mas oscuro.







El tejido meristemático se encuentra constituido por células de paredes primarias delgadas, con citoplasma denso y núcleo grande. Los meristemos permiten que se produzca el crecimiento del árbol en sentido longitudinal y diametral. El crecimiento longitudinal, también llamado crecimiento primario, se produce por la acción del meristemo apical; mientras que el crecimiento diametral o en grosor, también denominado crecimiento secundario, se produce por divisiones que ocurren en el cambium vascular y, en menor proporción, en el cambium cortical. La existencia de meristemos es una diferencia entre plantas y animales, los animales solo crecen hasta la cuarta edad, mientras que, las plantas gracias a los meristemos crecen toda su vida.




Cual es su función?



• Los meristemos apicales tienen tres funciones básicas:
• Autoperpetuarse .
• producir células somaticas .
• establecer los patrones de desarrollo.










Cual es la importancia de este tejido?





Los meristemos apicales o primarios son los responsables de la formación del cuerpo primario de la planta. Se encuentran en los ápices de raíces y tallos, principales y laterales. En el tallo, el meristema apical o cono vegetativo está protegido por los primordios foliares que lo envuelven formando las yemas. El meristemo primario de raíz presenta una particularidad: está protegido por la caliptra contra los daños mecánicos causados por el suelo. Por presentar este tejido, el meristema del ápice radical suele llamarse subapical. Además, las raíces laterales son endógenas y se originan en zonas ya diferenciadas.




Porque se usan los colorantes de safranina y fast green?





Imagen 3. podemos diferenciar la epidermis en un color cafe claro(1), hacia adentro de la epidermis se encuentra el tejido de relleno(2) teñido de verde-azul estas celulas son circulares y tienen esta coloracion por el proceso de tincion al que fue sometido, lo sigue un anillo mas oscuro que recibe el nombre de endodermis(3) y la medula(4) que es la porcion de tejido dentro del anillo.El periciclo no es diferenciable en la imagen.







La safranina ( tiñe rojo oscuro )y el fast green(verde claro) se usan como líquidos de contraste en algunos protocolos de tinción, coloreando el núcleo celular de rojo o azul oscuro.








Porque se usa glicerina?





La glicerina se utiliza para hidratar las muestras una vez son colocadas en la lamina luego de su tinción, así se evita el secado del tejido.


























UNA MIRADA PROFUNDA

A LA HIERBABUENA



La hierbabuena es una hibridación de dos tipos de menta: la menta negra, que tiene un tono violáceo, y la menta blanca, de un color verde más uniforme. La hierbabuena ofrece un fuerte aroma que la distingue de otro tipo de mentas. No suele sobrepasar los treinta centímetros de altura. Sus hojas tienen forma alargada y margen aserrado, y las flores nacen de espigas en el extremo más alto y van del color blanco al púrpura. Su origen se sitúa en Europa, África y Asia, aunque hoy su cultivo se extiende por todo el mundo.

Existen unas quince especies de menta distintas, que apenas se pueden distinguir entre sí por su gran parecido. Algunos teóricos sitúan la aparición del híbrido en Inglaterra, donde se extendió su cultivo durante el siglo XII.


CULTIVA

Se cultiva muy bien en macetas y en tierra pero necesita agua en abundancia y un buen drenaje.Requiere suelos freskos y humedos.La altitud del terreno,la humedad,la insolacion,la calidad del terreno y los abonos puede variar la produccion .


RECOLECCION

A la hora de recolectar la planta, podemos optar por la flor para infusiones o bien recoger los tallos y las hojas. Las ramas pueden cortarse en cualquier momento si se van a utilizar frescas. Deben cortarse las ramas cuando la planta está a punto de florecer. Entonces hojas y flores se dejan secar a la sombra y se guardan en recipientes herméticos, en ambiente seco y oscuro.

PROPIEDADES

Ya es bien conocido por las abuelas y algunas mamas que la hierbabuena es una planta aromática con muchísimas aplicaciones medicinales. Favorece en infusión las digestiones lentas, las inflamaciones del hígado y vesícula, los gases intestinales, alivia de los mareos, combinando propiedades estimulantes y sedantes, según el caso. También es útil como calmante de calambres musculares.

si mezclamos la infusión con aceite de oliva tendremos un excelente ungüento para curar las quemaduras. se administra por via tópica y en compresas, pero, sin duda, el uso más habitual es para aliviar desordenes digestivos como la acidez.


http://www.plantasyhogar.com/jardin/plantas/aromaticasymedicinales/?pagina=jardin_plantas_aromat

casymedicinales_018_018


HISTOMORFOLOGIA VEGETAL

En este blog encontraran un estudio de las estructuras principales de la hierbabuena hechas en laboratorio con el fin de reconocer y entender el funcionamiento de partes internas de la planta , ademas de llevarlos paso a paso por la preparacion de la hierbabuena(Mentha spicata) para cortes histologicos en el microtomo.
Somos estudiantes de biologia y es necesario para nosotros poner en practica los conocimientos adquiridos y su aplicacion a medios mundiales de comunicacion.