Procedimiento a llevar para un correcto corte en

microtomo de hierbabuena

1. FIJADOR: SOLUCION FAA alcochol etilico sl 70% 90 cm, acido acetico glacial 5cm y formol al 37% 37 cm. Tiempo de la fijacion 24 horas. se cortan las partes deseadas de la planta y se ponen en un envase que deja flotar las partes cortadas y deja reposar durante 24 horas .

2. se lava con alcohol al 50 % luego se pone en un casette de inclusion.

3. Proceso de desidratacion (alcoholes ascendentes).

Alcoholes

Al 50% x12 horas

Al70% x12 horas

Al 80% x12horas

Al95% x12horas

4. Proceso de aclaramiento: Se mete en una mezcla de alcochol etilico y ter butanol, una porcion por tres de alcohol etilico al 95% y se deja 12 horas.Se pone en alcochol etilico al 50% por 12 horas,Se pone en alcohol etilico y ter butanol por 12 horas,Ter butanol por 12 horas.

5.En parafina liquida al 50% y 50% de ter butanol por 6 horas,Se mete en parafina pura al 50% y terbutanol al 50% por 6 horas,despues se mete en parafina pura de nuevo al 56% por 6 horas.

6. se deja 12 horas en un horno para derretir la parafina ,con 30 ml de xilol se quita el exceso de parafina,despues con alcochol se quita el exceso de xilol,despues de vuelve a pasar por alcoholes 95%,80%,70%,50%.

7. se lava luego con H20 corriente y se pone un una solucion de safranina por 24 horas,Se lava con agua corriente y se quita el exceso de safranina,Se pasa por alcohol con gotas de acido clorhidrico que decolora la muestra

8. Luego en alcohol con gotas de amoniaco para neutralizar el decoloro,Se pasa en un alcochol al 95% y se contrasta con fast green por 20 segundos,Se pasa por escencia de clavo o aceite de clavo y xilol .

Escencia de clavo y en etil butanol.

Y por ultimo se lleva a cortar al microtomo para lograr un corte perfecto de la muestra tomada de la planta deseada.